I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品是組織工程醫(yī)療產(chǎn)品之一，今日，國家藥監(jiān)局發(fā)布《I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品注冊審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）》，并面向公眾公開征求意見。具體見正文。

I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品注冊審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門對注冊申報(bào)資料的審評(píng)提供參考。

本指導(dǎo)原則是對I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品注冊申報(bào)資料的一般要求，申請人需依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評(píng)人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評(píng)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，需在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將進(jìn)行適時(shí)的調(diào)整。

一、適用范圍

根據(jù)產(chǎn)品的形式，I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品主要分為兩大類：I型膠原軟骨修復(fù)凝膠，具有微觀網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)；I型膠原軟骨修復(fù)固體支架（包括海綿狀或膜片狀），可為單層或多層。本指導(dǎo)原則適用于I型膠原軟骨修復(fù)凝膠類產(chǎn)品。

本指導(dǎo)原則所涉及的I型膠原軟骨修復(fù)凝膠類產(chǎn)品，是指所用原材料限定于由動(dòng)物（牛、豬、鼠、魚等）的組織（皮膚、肌腱、骨骼等）提取、分離及純化（交聯(lián)或非交聯(lián)）得到的I型或I/III型膠原蛋白，可采用不同的物理、化學(xué)交聯(lián)方法及其它工藝制備而成的凝膠狀支架產(chǎn)品。

該指導(dǎo)原則不適用于重組膠原蛋白制成的產(chǎn)品，也不包括含細(xì)胞（如軟骨細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞）、生物因子（如干細(xì)胞生長因子、骨形態(tài)發(fā)生蛋白）等的產(chǎn)品，亦不包括預(yù)期與細(xì)胞或生物活性因子組合使用的產(chǎn)品。相關(guān)藥械組合產(chǎn)品應(yīng)遵循其它相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或指導(dǎo)原則等的要求，復(fù)合其他材料制備的特殊設(shè)計(jì)及創(chuàng)新設(shè)計(jì)的軟骨修復(fù)產(chǎn)品可參考本指導(dǎo)原則中適用的部分。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品的命名需采用《醫(yī)療器械分類目錄》或國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的通用名稱，或以產(chǎn)品臨床預(yù)期用途、固化方式、適用部位為依據(jù)命名，需符合《醫(yī)療器械通用名稱命名規(guī)則》等相關(guān)法規(guī)的要求。

2.分類編碼

根據(jù)《醫(yī)療器械分類目錄》，分類編碼為13-10，管理類別為III類。

（二）綜述資料

1.產(chǎn)品描述

需全面描述產(chǎn)品I型膠原蛋白及其它成分的含量、純度及來源，產(chǎn)品結(jié)構(gòu)形式（結(jié)構(gòu)示意圖和/或?qū)嵨飯D）、主要成型工藝、工作原理、交付狀態(tài)、滅菌方式及貨架有效期等，以及區(qū)別于其他同類產(chǎn)品的特征等。

2.作用機(jī)理

需描述產(chǎn)品的作用機(jī)理，建議提供產(chǎn)品的操作步驟說明及圖示。

3.適用范圍和禁忌證

產(chǎn)品的適用范圍、適用人群、禁忌證需與申報(bào)產(chǎn)品的性能和功能相符。

3.1適用范圍

I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品一般用于限定面積的軟骨缺損的修復(fù)，需明確預(yù)期手術(shù)術(shù)式、植入部位及與其組合使用的其它器械和醫(yī)療產(chǎn)品。

3.2預(yù)期使用環(huán)境

明確預(yù)期使用的地點(diǎn)（如醫(yī)療機(jī)構(gòu)的條件），說明可能影響其安全性和有效性的環(huán)境條件。

3.3適用人群

明確目標(biāo)患者人群信息、患者選擇標(biāo)準(zhǔn)信息以及明確使用過程中需要考慮的因素。

3.4禁忌證

如適用，通過風(fēng)險(xiǎn)/受益評(píng)估后，針對某些疾病、情況或特定的人群，認(rèn)為不推薦使用該產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)明確說明，如對產(chǎn)品材料成分過敏的人群。

4.產(chǎn)品型號(hào)規(guī)格

提供產(chǎn)品各型號(hào)規(guī)格的劃分原則。對于存在多種型號(hào)、規(guī)格的產(chǎn)品，需明確各型號(hào)、規(guī)格的區(qū)別，采用對比表及帶有說明性文字的圖片、圖表，對各種型號(hào)、規(guī)格的結(jié)構(gòu)組成、功能、產(chǎn)品特征、性能指標(biāo)等方面加以描述。需提供體現(xiàn)產(chǎn)品設(shè)計(jì)特征的關(guān)鍵信息，如成分配比、體積或重量、產(chǎn)品裝量等。

5.與同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品的比較信息

應(yīng)當(dāng)提供同類產(chǎn)品（國內(nèi)外已上市）或前代產(chǎn)品（如有）的信息，闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。對于同類產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)說明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

申請人需綜述同類產(chǎn)品國內(nèi)外研究及臨床使用現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢，同時(shí)列表比較說明申報(bào)產(chǎn)品與參考產(chǎn)品（同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品）在材料工作原理、結(jié)構(gòu)組成、制造材料、性能指標(biāo)、適用范圍、作用方式、應(yīng)用技術(shù)等方面的異同。明確產(chǎn)品有無使用新材料、新的活性成分、新技術(shù)、新設(shè)計(jì)或具有新作用機(jī)理和新功能。

6.包裝說明

提供產(chǎn)品的包裝信息，包括包裝形式、包裝材料、包裝工藝。對于具有微生物限度要求的醫(yī)療器械，應(yīng)當(dāng)說明保持其微生物限度的包裝信息。說明如何確保最終使用者可清晰地辨識(shí)包裝的完整性。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)管理資料

注冊申請人需對產(chǎn)品全生命周期實(shí)施風(fēng)險(xiǎn)管理，提交風(fēng)險(xiǎn)管理資料（參照GB/T 42062《醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》），充分識(shí)別產(chǎn)品的設(shè)計(jì)、原材料、制造過程、產(chǎn)品包裝、滅菌、運(yùn)輸、貯存、使用等產(chǎn)品生命周期內(nèi)各個(gè)環(huán)節(jié)的安全特征，從生物學(xué)危險(xiǎn)（源）、環(huán)境危險(xiǎn)（源）等方面，對產(chǎn)品進(jìn)行全面的風(fēng)險(xiǎn)分析，并詳述所采取的風(fēng)險(xiǎn)控制措施。

風(fēng)險(xiǎn)管理報(bào)告需包括生產(chǎn)和生產(chǎn)后信息，具體內(nèi)容參考GB/T 42062第9章和《醫(yī)療器械安全和性能的基本原則》的2.1.2e)f)。產(chǎn)品變更注冊和已在境外上市產(chǎn)品注冊時(shí)，申報(bào)資料中的風(fēng)險(xiǎn)管理報(bào)告需包括上述內(nèi)容，將風(fēng)險(xiǎn)管理貫穿于產(chǎn)品的全生命周期。

2.醫(yī)療器械安全和性能基本原則清單

說明產(chǎn)品符合《醫(yī)療器械安全和性能基本原則清單》各項(xiàng)適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求的主要性能指標(biāo)

產(chǎn)品技術(shù)要求需符合相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)法律、法規(guī)的相應(yīng)要求。在此基礎(chǔ)上，注冊申請人需根據(jù)產(chǎn)品的特點(diǎn)，制定確保產(chǎn)品安全、有效的技術(shù)要求。產(chǎn)品技術(shù)要求中試驗(yàn)方法需依據(jù)有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、國際標(biāo)準(zhǔn)制訂，或經(jīng)過充分的驗(yàn)證。

3.1產(chǎn)品型號(hào)/規(guī)格及其劃分的說明

列表說明產(chǎn)品的型號(hào)、規(guī)格，明確產(chǎn)品型號(hào)、規(guī)格的劃分說明，明示產(chǎn)品組成及結(jié)構(gòu)。推薦采用圖示和/或表格的方式。

3.2性能指標(biāo)

根據(jù)產(chǎn)品特性，選擇適用的項(xiàng)目進(jìn)行規(guī)定，例如外觀（如性狀、顏色）、可見異物、裝量、膠原蛋白含量、復(fù)合成分含量（若適用）、總糖含量、脂肪含量、伴生的其他類型膠原、雜蛋白分析、水分、酸堿度、熾灼殘?jiān)⑺崴猱a(chǎn)物、色氨酸檢查（去端肽時(shí)）、重金屬總量和微量元素、添加劑（包括溶劑）殘留、交聯(lián)劑殘留（若適用）、無菌性、環(huán)氧乙烷殘留（若適用）、細(xì)菌內(nèi)毒素等。

3.3檢驗(yàn)方法

產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法需根據(jù)技術(shù)性能指標(biāo)設(shè)定，檢驗(yàn)方法需優(yōu)先采用公認(rèn)的或已頒布的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法（可參考本指導(dǎo)原則參考文獻(xiàn)中引用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)）；自建檢驗(yàn)方法需提供相應(yīng)的方法學(xué)依據(jù)及理論基礎(chǔ)，同時(shí)保證檢驗(yàn)方法具有可操作性和可重現(xiàn)性，必要時(shí)可附相應(yīng)圖示進(jìn)行說明，文本較大的可以附錄形式提供。

3.4附錄

產(chǎn)品材料的理化性能特征，以資料性附錄形式體現(xiàn)。對于膠原材料，一般需考慮熔點(diǎn)、膠原蛋白分子量（含動(dòng)力黏度）、膠原蛋白純度、肽圖，同時(shí)建議考慮膠原蛋白高級(jí)結(jié)構(gòu)分析、膠原蛋白自組裝性能、熱穩(wěn)定性、膠原蛋白-細(xì)胞相互作用等。

4.研究資料

注冊申請人需提供產(chǎn)品技術(shù)要求的研究和編制說明，包括功能性、安全性指標(biāo)的確定依據(jù)，所采用的標(biāo)準(zhǔn)或方法、采用的原因及理論基礎(chǔ)。需提供產(chǎn)品材料和產(chǎn)品設(shè)計(jì)相關(guān)理化及生物性能的研究資料，并提供其可接受的依據(jù)，必要時(shí)，與已上市同類產(chǎn)品相關(guān)性能進(jìn)行對比，以證明其安全有效性。研究資料選擇適用的項(xiàng)目進(jìn)行研究驗(yàn)證，主要包括但不限于如下研究項(xiàng)目：

4.1化學(xué)/材料表征研究

4.1.1膠原蛋白材料表征

需明確產(chǎn)品I型膠原的具體來源及其制備工藝。膠原蛋白材料的表征至少需包括如下項(xiàng)目：

4.1.1.1 I型膠原蛋白分子量

按照YY/T 1805.2《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 膠原蛋白 第2部分 I型膠原蛋白分子量檢測十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法》 進(jìn)行測試。

4.1.1.2 I型膠原蛋白純度

膠原蛋白具有其他蛋白所沒有的三股螺旋結(jié)構(gòu)，可以在特異性的膠原蛋白酶作用下水解形成小分子多肽或者氨基酸；而非膠原蛋白卻不會(huì)受到膠原蛋白酶的水解作用。因此，可以利用膠原蛋白酶水解樣品，結(jié)合考馬斯亮藍(lán)對牛血清白蛋白（BSA）染色極限的確定，檢測膠原蛋白樣品中所含雜蛋白總量，進(jìn)而通過相應(yīng)計(jì)算得到膠原蛋白純度。

具體方法參照YY/T 1453《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 I型膠原蛋白表征方法》中的規(guī)定進(jìn)行。

4.1.1.3 肽圖

參照YY/T 1453《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 I型膠原蛋白表征方法》中規(guī)定方法測試。即，將樣品進(jìn)行熱變性后，通過胰蛋白酶使變性膠原降解；然后按照《中華人民共和國藥典》四部3405肽圖檢查法第一法規(guī)定的方法進(jìn)行。

4.1.1.4其它

隨著相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的更新，需進(jìn)一步開展膠原蛋白高級(jí)結(jié)構(gòu)分析、膠原蛋白自組裝性能、熱穩(wěn)定性、膠原蛋白-細(xì)胞相互作用等研究。

4.1.2產(chǎn)品組成成分表征

4.1.2.1 I型膠原蛋白鑒別

參照YY/T 1453《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 I型膠原蛋白表征方法》規(guī)定方法進(jìn)行測試。即，按照《中華人民共和國藥典》四部0541電泳法第四法規(guī)定的方法進(jìn)行，用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法，分離膠濃度為7%，加樣量應(yīng)不低于20μg，比較樣品、I型膠原蛋白對照品經(jīng)過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析后的譜帶。樣品與I型膠原蛋白對照品電泳條帶應(yīng)一致。

4.1.2.2膠原蛋白含量

參照YY/T 1453《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 I型膠原蛋白表征方法》中規(guī)定方法測試。I型膠原蛋白原料經(jīng)干燥恒重后，精密量取供試品（約相當(dāng)于含氮量1.0mg～2.0mg），按照《中華人名共和國藥典》四部0731蛋白質(zhì)含量測定法第一法規(guī)定進(jìn)行，得到樣品中總蛋白含量，結(jié)果以干重計(jì)。

膠原蛋白含量（%）= 樣品中總蛋白含量（%）× 純度

4.1.2.3 總糖含量

參照YY/T 1453《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 I型膠原蛋白表征方法》中規(guī)定方法測試，以D-無水葡萄糖為對照，精確量取空白組（HCl 0.01mol/L）、對照組系列溶液（含D-無水葡萄糖20-100ug）、供試品溶液（含膠原2～20mg，HCl 0.01mol/L）各2ml，精確加入5%苯酚溶液1mL，然后迅速加入濃硫酸5.0mL，搖勻，40℃水浴保持40min，取出后迅速放入冰水中冷卻20min。利用樣品中多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后與苯酚生成橙黃色化合物，在波長490nm處進(jìn)行比色測定。然后通過對照品吸光度-濃度回歸方程，計(jì)算出樣品中相當(dāng)于以D-無水葡萄糖的質(zhì)量。

4.1.2.4脂肪含量

參照YY/T 1453中規(guī)定方法測試。即，稱取干燥恒重的樣品3g-5g（約含脂肪20mg-100mg），移入到250mL燒瓶中，加入約100mg焦性沒食子酸和十一碳酸甘油三脂內(nèi)標(biāo)溶液2mL，加入幾粒沸石，再加入2mL 95%乙醇，混勻。然后加入8.3mol/L鹽酸溶液10mL，混勻。將燒瓶放入70℃-80℃水浴中水解40min。每隔10min震蕩下燒瓶，使粘附在燒瓶上的顆粒物混入溶液中。水解完成后，取出燒瓶冷卻至室溫。最后加入10mL乙醇混勻。按照GB/T 22223的方法對樣品中的總脂肪含量進(jìn)行測定，結(jié)果以樣品干重計(jì)。

4.1.2.5伴生的其他類型膠原    

與I型膠原伴生的III型膠原、V型膠原，對I型膠原自組裝有影響，應(yīng)評(píng)估和控制其在終產(chǎn)品中的含量，以確保產(chǎn)品批次間的一致性。其中，III型膠原作為I型膠原主要的伴生膠原，可以采用天狼猩紅染色或者更精確的免疫組化、免疫熒光、ELISA等技術(shù)對I型和III型膠原進(jìn)行鑒別與量化。

天狼猩紅染色法鑒別I型膠原與III型膠原的原理是：由于天狼猩紅是一種強(qiáng)酸性陰離子染料，可與呈堿性的膠原反應(yīng)，使膠原纖維在偏振光照射時(shí)，產(chǎn)生明顯的雙折光現(xiàn)象。不同的膠原纖維具有不同的旋光性，在偏振光顯微鏡下呈現(xiàn)相異的顏色，借以區(qū)分I、II、III和IV型膠原。其中，I型纖維緊密排列，顯示很強(qiáng)的雙折光性，呈黃色或紅色的纖維；II型纖維顯示弱的雙折光，呈多種色彩的疏松網(wǎng)狀分布；III型纖維顯示弱的雙折光，呈綠色的細(xì)纖維；IV型纖維顯示弱的雙折光的基膜，呈淡黃色。因此，可以通過天狼猩紅染色對I型膠原和III型膠原進(jìn)行鑒別與量化。

天狼猩紅染色法：I型膠原溶液經(jīng)冷凍干燥后，通過常規(guī)石蠟包埋、切片（約5μm）、脫蠟至水，然后切片在1g/L的天狼猩紅溶液中染色1h。染色后切片經(jīng)過常規(guī)脫水透明后，用中性樹脂封固，室溫放置干燥。干燥后的切片在偏光纖維鏡下觀察拍照，并通過圖像分析軟件對兩種顏色的膠原纖維面積進(jìn)行分析，得到不同類型膠原的含量。

4.1.2.6重金屬總量和微量元素

其中，重金屬總量以Pb計(jì)。取膠原熾灼殘?jiān)逻z留的殘?jiān)凑铡吨腥A人民共和國藥典》0821重金屬檢查法第二法進(jìn)行。

微量元素參照YY/T 1453《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 I型膠原蛋白表征方法》中規(guī)定方法測試。即，精密稱取樣品，經(jīng)硝酸消化，制成供試品溶液，通過原子吸收分光光度計(jì)測定鉻、鎘、銅、鐵、鎳、鉛、鉬的含量，用原子熒光光譜儀分析法測定砷和汞的含量。

4.1.2.7有毒物殘留

I型膠原提取制備過程中，可能存在有毒成分如三氯甲烷、過氧乙酸等殘留。參照《中華人民共和國藥典》相應(yīng)檢測方法進(jìn)行測試。

4.1.2.8酸堿度

酸堿度（pH值）是影響膠原分子發(fā)生自組裝的關(guān)鍵條件，pH為7.0-7.5 的膠原溶液可以順利的形成凝膠且成膠時(shí)間和成膠效果不會(huì)受到明顯的影響。按照《中國藥典》 四部通則0631的pH值測定法，取膠原凝膠前驅(qū)體溶液，采用酸度計(jì)測定pH值。

4.1.2.9外源性DNA殘留     

按照《中華人民共和國藥典》四部3407外源性DNA殘留量測定法“熒光染色法”或“定量PCR法”進(jìn)行?；蛘邊⒄誝Y/T 1876《組織工程醫(yī)療產(chǎn)品 動(dòng)物源性生物材料DNA殘留量測定法：熒光染色法》中規(guī)定方法測試。

4.1.2.10 α-Gal殘留

α-半乳糖基抗原（簡稱 Gal 抗原）是動(dòng)物組織、器官移植到人體引起超急性免疫排斥反應(yīng)的主要靶抗原，廣泛存在于牛、豬和其他低等動(dòng)物體內(nèi)，人體由于有 2 個(gè)堿基錯(cuò)位變異而不表達(dá) Gal 抗原，但人血清中存在高滴度的抗-Gal 抗體，因此當(dāng)人體接受含有 Gal 抗原的組織或生物材料時(shí)就會(huì)引起補(bǔ)體介導(dǎo)的抗體依賴型細(xì)胞毒性效應(yīng)，引起免疫排斥及免疫毒理反應(yīng)。Gal 抗原缺失小鼠已被廣泛應(yīng)用于異種免疫原性評(píng)價(jià)。參照YY/T 1561《組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 動(dòng)物源性支架材料殘留α-Gal》中規(guī)定方法進(jìn)行測試。

4.1.2.11 EO殘留

對于經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后產(chǎn)品的EO殘留量的可耐受接觸限量，建議參考GB/T 16886.7《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第7部分：環(huán)氧乙烷殘留量》中4.3.5.2的要求進(jìn)行規(guī)定。

4.1.2.12復(fù)合組分分布

對于含復(fù)合材料（如緩沖液、中和成分等）的產(chǎn)品，需通過紅外光譜、拉曼光譜、X射線能譜等方法對原材料中復(fù)合組分的分布進(jìn)行研究。

4.2物理和機(jī)械性能研究

4.2.1凝膠化性能和可注射性

凝膠化性能對原位注射賦型的膠原水凝膠非常重要，可以通過傾斜法、濁度法、光散射法以及動(dòng)態(tài)流變儀等檢測手段表征膠原分子聚合動(dòng)力學(xué)、聚合能力、凝膠化時(shí)間等。

4.2.1.1凝膠化性能

傾斜法：將調(diào)整到中性的膠原溶液裝入玻璃試劑瓶中，間隔固定時(shí)間倒置觀察玻璃瓶中溶液流動(dòng)情況，當(dāng)?shù)怪煤笕芤翰涣鲃?dòng)則表明膠原溶液已固化交聯(lián)，此時(shí)的時(shí)間定義為凝膠化時(shí)間。

流變學(xué)測試：將調(diào)整到中性的膠原溶液滴加在流變儀測試臺(tái)上，在固定剪切頻率0.1 rad/s和固定形變0.1%下，測試樣品儲(chǔ)能模量(G’)和損耗模量(G’’)隨時(shí)間的變化曲線，初始時(shí)儲(chǔ)能模量低于損耗模量，一定時(shí)間后，儲(chǔ)能模量等于損耗模量，該時(shí)間點(diǎn)定義為成膠時(shí)間。

水凝膠交聯(lián)度在很大程度上影響著物理性能，實(shí)際交聯(lián)程度與理論交聯(lián)程度的比值可直接反映交聯(lián)度。在某些情況下，可簡單地通過計(jì)算成膠后浸出物的比例來反映水凝膠交聯(lián)程度。

4.2.1.2可注射性

主要通過測量剪切粘度來予以判定。

剪切變稀表征：以流變儀和固定形變（0.1%），進(jìn)行剪切應(yīng)力掃描或剪切頻率掃描，測試隨剪切應(yīng)力或剪切速率增加水凝膠樣品的粘度變化。

宏觀可注射性：通過壓縮實(shí)驗(yàn)檢測推動(dòng)注射器所需力大小，考察不同條件下（儲(chǔ)存時(shí)間、注射濃度、溫度、針頭大小等）其可注射性能。

4.2.2水性環(huán)境下的形態(tài)穩(wěn)定性

4.2.2.1溶脹或收縮性能

正常軟骨的含水率約為70%（65%-80%），并因此維持著良好的營養(yǎng)物質(zhì)透過性能。高的含水率有利于支架材料相關(guān)營養(yǎng)物質(zhì)的滲透運(yùn)輸。通過測定材料浸泡前后的質(zhì)量或者體積變化對材料的溶脹速率、或收縮性能進(jìn)行表征。

將固定尺寸的水凝膠樣品稱重并記錄體積，然后將樣品浸泡于pH 7.4的PBS緩沖液中，置于37℃恒溫?fù)u床中，放置固定時(shí)間，取出水凝膠材料，用濾紙擦掉材料表面多余水分，進(jìn)行稱重并測定樣品體積。分別計(jì)算溶脹和收縮情況下樣品質(zhì)量和體積變化率。

4.2.2.2保水性

制備好的水凝膠放置在舒適的自然條件下，記錄溫濕度變化。在一段時(shí)間內(nèi)測定凝膠的質(zhì)量變化，用質(zhì)量百分?jǐn)?shù)表示。前后質(zhì)量差與初始質(zhì)量之比定義為質(zhì)量變化百分比。              4.2.3體外力學(xué)性能

機(jī)械性能或者粘彈性在影響細(xì)胞行為與細(xì)胞誘導(dǎo)的基質(zhì)重塑中具有重要作用，根據(jù)材料的形態(tài)與大小選擇，通過流變儀、動(dòng)態(tài)力學(xué)分析儀（DMA）、納米壓痕儀（Nano-indenter）等對膠原水凝膠力學(xué)性能(壓縮、剪切等模式)與粘彈性（蠕變、應(yīng)力松弛、動(dòng)態(tài)力學(xué)）進(jìn)行測試。需注意材料模量等與組織的匹配度及體內(nèi)生物力學(xué)微環(huán)境影響下的穩(wěn)定性。

4.2.3.1彈性模量

以DMA對樣品進(jìn)行壓縮測試，分析其壓縮曲線，在低形變線性彈性區(qū)（一般0 -15%）計(jì)算樣品的彈性模量。

4.2.3.2蠕變和應(yīng)力松弛

在應(yīng)力松弛表征時(shí)，固定材料形變，觀察應(yīng)力隨時(shí)間的變化趨勢；在蠕變行為表征時(shí)，固定施加在材料上的初始應(yīng)力，觀察形變隨時(shí)間的變化趨勢。

4.2.3.3體外抗疲勞性能

對于承重部位的軟骨，在人的日常活動(dòng)中要經(jīng)歷反復(fù)的擠壓，因此對于膠原水凝膠軟骨修復(fù)材料的抗疲勞力學(xué)性能也提出了相應(yīng)的要求，可采用液體浸沒式材料動(dòng)態(tài)力學(xué)性能測試儀（DMA）等儀器對水凝膠的抗疲勞性能進(jìn)行考察。

循環(huán)壓縮強(qiáng)度：通過壓縮加載-卸載循環(huán)研究水凝膠的能量耗散。膠原水凝膠樣品被壓縮到一定應(yīng)變（一般0-30%）下循環(huán)10次。需根據(jù)應(yīng)力應(yīng)變定義出能量耗散方程。

通過兩種加載方法測試材料的抗疲勞性能：第一種為線性循環(huán)加載，使用DMA測試，以恒定加載速率加載至固定壓力，然后以相同速率卸載，循環(huán)一定次數(shù)，獲得應(yīng)力-應(yīng)變曲線；第二種為循環(huán)加載卸載，使用DMA進(jìn)行測試，以恒定的加載壓力和加載-卸載頻率，循環(huán)一定次數(shù)，獲得形變隨時(shí)間變化的曲線。

4.2.4微觀結(jié)構(gòu)

膠原水凝膠的纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)模擬了細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的微觀結(jié)構(gòu)，影響細(xì)胞的粘附、鋪展和分化?？蓪⑺z樣品經(jīng)液氮處理后凍干，通過掃描電子顯微鏡(SEM)觀察纖維形態(tài)、直徑、分布以及多孔結(jié)構(gòu)。拍攝后的圖像可采用Image J等圖像處理軟件對其進(jìn)行處理和數(shù)據(jù)收集，而后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)算，但凍干過程引起了凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)改變，故僅作為間接評(píng)價(jià)方法。或者，水凝膠樣品直接采用低溫掃描電子顯微鏡(cryo-SEM)或環(huán)境掃描電子顯微鏡對樣品的孔結(jié)構(gòu)、纖維形態(tài)等進(jìn)行表征。

4.2.5傳質(zhì)性能

物質(zhì)傳遞性能指細(xì)胞、營養(yǎng)、廢物物質(zhì)向基質(zhì)中或者在基質(zhì)中擴(kuò)散的能力，可通過熒光染料-共聚焦顯微鏡、擴(kuò)散室、光密度分析等表征。材料需有利于細(xì)胞黏附、遷移和增殖；有利于氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)傳輸；有利于代謝物的排出和組織的長入。

為檢測膠原水凝膠營養(yǎng)物質(zhì)的透過性能，可采用氯化鈉作為營養(yǎng)物質(zhì)中離子性物質(zhì)的代表，色氨酸作為小分子營養(yǎng)物質(zhì)的代表，測定氯化鈉和色氨酸的透過率；同時(shí)，可通過共聚焦顯微鏡觀察熒光蛋白分子的擴(kuò)散來表征水凝膠對蛋白分子的透過率。

4.3生物學(xué)特性研究

4.3.1生物相容性評(píng)價(jià)資料

生物相容性評(píng)價(jià)應(yīng)遵循GB/T 16886.1《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)》相關(guān)要求，生物相容性評(píng)價(jià)資料可以參考《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)指南》，結(jié)合產(chǎn)品的預(yù)期接觸部位和累積使用的接觸時(shí)間，必要時(shí)開展生物學(xué)試驗(yàn)。生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)終點(diǎn)一般包括細(xì)胞毒性、致敏、刺激或皮內(nèi)反應(yīng)、材料介導(dǎo)的致熱性、急性全身毒性、亞急性毒性、慢性毒性、亞慢性毒性、植入反應(yīng)、遺傳毒性和致癌性。需結(jié)合物理和/或化學(xué)表征、降解性能等論證產(chǎn)品在上述各項(xiàng)生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定終點(diǎn)的安全性。

4.3.2生物學(xué)性能

對產(chǎn)品與軟骨修復(fù)相關(guān)的生物學(xué)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，一般可開展產(chǎn)品對細(xì)胞的粘附、遷移、增殖、分化等影響的生物學(xué)性能評(píng)價(jià)試驗(yàn)。I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品（支架或凝膠）在植入軟骨缺損部位后，通過宿主細(xì)胞（骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、滑膜來源干細(xì)胞、周圍軟骨細(xì)胞）的遷移長入、增殖、分泌細(xì)胞外基質(zhì)，預(yù)期將形成透明軟骨組織/纖維軟骨組織，實(shí)現(xiàn)對軟骨病損部位的修復(fù)再生。這個(gè)修復(fù)再生過程可能會(huì)長達(dá)6個(gè)月至1年，在這個(gè)過程中，患者被動(dòng)/主動(dòng)的活動(dòng)對植入部位施加的力學(xué)載荷也可能與產(chǎn)品的修復(fù)再生效果相關(guān)。

在擬進(jìn)行體外模擬研究而設(shè)定體外試驗(yàn)參數(shù)時(shí)，宜充分考慮與產(chǎn)品修復(fù)再生關(guān)節(jié)軟骨相關(guān)的體內(nèi)因素，如細(xì)胞類型、細(xì)胞數(shù)量、力學(xué)刺激等。用作體外研究的產(chǎn)品樣品宜具有代表性，需注意樣品尺寸（厚度）與全型產(chǎn)品不同對體外試驗(yàn)結(jié)果的影響。體外細(xì)胞試驗(yàn)宜選擇預(yù)期體內(nèi)發(fā)揮修復(fù)再生作用的主要細(xì)胞類型，細(xì)胞接種方式、細(xì)胞接種數(shù)量要能與植入后初期/早期能長入/遷移入產(chǎn)品的方式和細(xì)胞數(shù)量相適宜。需要對采用的細(xì)胞培養(yǎng)條件提供合理化理由，例如考慮體內(nèi)軟骨修復(fù)時(shí)的體液環(huán)境/軟骨的營養(yǎng)方式等，可考慮采用無血清培養(yǎng)基或低百分比含量血清的培養(yǎng)基、低氧培養(yǎng)條件等。體外細(xì)胞試驗(yàn)也可考慮施加力學(xué)刺激，例如靜水壓。

在體外細(xì)胞試驗(yàn)環(huán)節(jié)，需對與I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品軟骨修復(fù)相關(guān)的生物學(xué)性能建立半定量/定量的指標(biāo)和檢測方法。例如，如考慮I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品支持軟骨相關(guān)細(xì)胞的增殖、遷移和/或細(xì)胞外基質(zhì)的分泌等，這些性能與軟骨修復(fù)相關(guān)，則宜建立相應(yīng)的檢測細(xì)胞增殖、遷移和/或細(xì)胞外基質(zhì)分泌等試驗(yàn)方法，通過對多批次產(chǎn)品的檢驗(yàn)/工藝研究，獲得相關(guān)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。由于體外細(xì)胞試驗(yàn)的特性和局限性，在研發(fā)/工藝研究過程中，需要通過動(dòng)物試驗(yàn)、臨床試驗(yàn)結(jié)果來驗(yàn)證這些預(yù)期生物學(xué)性能的相關(guān)性。推薦在這樣的體外試驗(yàn)/細(xì)胞試驗(yàn)、體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)/臨床試驗(yàn)環(huán)節(jié)中，確定I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品與其軟骨修復(fù)間具有因果關(guān)系的生物學(xué)性能。并且，由于體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)費(fèi)時(shí)和不易進(jìn)行，推薦建立體外生物學(xué)/細(xì)胞試驗(yàn)的定量檢測方法，對與產(chǎn)品軟骨修復(fù)具有因果關(guān)系的生物學(xué)性能進(jìn)行表征，從而可作為不同批次間I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量控制指標(biāo)之一。從另一方面考慮，這也是由于I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品材料特性影響因素眾多并且特性復(fù)雜，例如提取的I型膠原受動(dòng)物來源、提取工藝的影響，I型膠原具有復(fù)雜的蛋白質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)，制成支架材料后又增加了與支架材料相關(guān)的特性，目前有關(guān)I型膠原蛋白或支架的某項(xiàng)/某些材料特性與軟骨修復(fù)性能因果關(guān)系的直接證據(jù)不足，一般認(rèn)為通過某項(xiàng)/某些材料特性的表征不能直接預(yù)示體內(nèi)修復(fù)效果。因此，宜在I型膠原材料特性表征的基礎(chǔ)上，建立對I型膠原生物學(xué)特性的體外生物學(xué)/細(xì)胞試驗(yàn)的定量檢測方法，達(dá)成對I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量控制。

4.3.3生物安全性評(píng)價(jià)資料

可參照《動(dòng)物源性醫(yī)療器械注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》的要求提供產(chǎn)品免疫原性評(píng)價(jià)資料以及病毒滅活評(píng)價(jià)資料。

Ⅰ型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品的免疫原性的研究、評(píng)價(jià)與控制資料主要包括：免疫原性毒理學(xué)/臨床相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)資料、免疫毒理學(xué)試驗(yàn)資料、免疫原性風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的質(zhì)量控制資料以及免疫原性相關(guān)不良事件資料等。應(yīng)對熱原進(jìn)行控制，致熱反應(yīng)推薦采用家兔法。且應(yīng)將內(nèi)毒素水平控制列入出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目。對于通過提純?nèi)コ庖咴晕镔|(zhì)的Ⅰ型膠原蛋白，可通過雜蛋白的含量指標(biāo)進(jìn)行控制；對于通過脫細(xì)胞工藝去除免疫原性物質(zhì)的Ⅰ型膠原蛋白，應(yīng)考慮殘留細(xì)胞數(shù)量、殘留DNA數(shù)量和/或殘留α-Gal抗原的數(shù)量等指標(biāo)。注冊申請人應(yīng)根據(jù)具體產(chǎn)品特性，考慮需增加的性能研究項(xiàng)目，如端肽、損傷相關(guān)的分子模式（DAMPs）、核酸降解酶以及特異性抗體檢測，對于以上列舉的項(xiàng)目中，如有不適用項(xiàng)，亦應(yīng)說明具體理由。

在選擇免疫學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目和設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案時(shí)應(yīng)充分考慮人與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬差異。Gal抗原缺失動(dòng)物可能是評(píng)價(jià)動(dòng)物源性生物材料免疫原性的合適模型。如果結(jié)合“植入材料特異性抗體檢測”，可以同時(shí)檢測特異性抗Gal抗體之外的材料特異性抗體。Gal抗原缺失小鼠已被廣泛應(yīng)用于異種免疫原性評(píng)價(jià)。

在參考GB/T 16886.20分析選擇體外免疫學(xué)試驗(yàn)時(shí)，要充分考慮樣品制備的合理性，比如使用浸提液用于實(shí)驗(yàn)樣品時(shí)要充分分析和證明抗原物質(zhì)是否全部被有效浸提出來。應(yīng)客觀地分析實(shí)驗(yàn)體系的局限性。建議參考最新文獻(xiàn)研究，合理選擇體外免疫學(xué)試驗(yàn)方法，客觀地評(píng)價(jià)異種免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。

若產(chǎn)品采用常見的病毒滅活工藝，如有機(jī)物、射線、強(qiáng)酸等，其過程和方法相對成熟，申請人可采用文獻(xiàn)或歷史數(shù)據(jù)對病毒滅活效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，必要時(shí)針對申報(bào)產(chǎn)品開展病毒滅活試驗(yàn)驗(yàn)證。

鑒于產(chǎn)品主要成分為膠原，宜考慮病毒滅活工藝對膠原性能的影響，以及對產(chǎn)品有效性的影響。

4.4體外降解性能

適宜的降解行為對軟骨組織修復(fù)具有重要作用，尤其需要關(guān)注材料的降解速率和軟骨組織再生速率的匹配。

4.4.1宏觀形貌變化

采用相機(jī)、光學(xué)顯微鏡等對降解不同程度的材料進(jìn)行宏觀形貌的表征。

4.4.2體積和質(zhì)量的變化

將固定尺寸的水凝膠樣品稱重并標(biāo)記體積，隨后將其浸泡在 pH 7.4的 PBS溶液（或膠原酶溶液）中并轉(zhuǎn)移至恒溫?fù)u床（37℃）， 在指定時(shí)間點(diǎn) （如1、3、5、7、9、14和21天）取出，用濾紙擦掉樣品表面多余水分，進(jìn)行稱重并測定樣品體積。樣品的降解率以質(zhì)量變化率或者體積變化率表示，通過記錄樣品在不同時(shí)間點(diǎn)的降解率，獲得其隨時(shí)間變化的規(guī)律，分別計(jì)算質(zhì)量和體積變化率。

4.4.3 力學(xué)性能變化

采用動(dòng)態(tài)力學(xué)分析儀對不同降解時(shí)間點(diǎn)的膠原水凝膠樣品，參考4.2.3中的項(xiàng)目進(jìn)行力學(xué)性能表征。

4.5動(dòng)物試驗(yàn)研究

4.5.1動(dòng)物試驗(yàn)決策及設(shè)計(jì)

需按照《醫(yī)療器械動(dòng)物試驗(yàn)研究注冊審查指導(dǎo)原則 第一部分：決策原則》決策是否需開展動(dòng)物試驗(yàn)研究。如開展動(dòng)物試驗(yàn)研究，需按照《醫(yī)療器械動(dòng)物試驗(yàn)研究注冊審查指導(dǎo)原則 第二部分：試驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)施質(zhì)量保證》進(jìn)行，并遵循3R原則。需關(guān)注動(dòng)物模型建立的科學(xué)性和合理性，以及對臨床的借鑒意義。

對于I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品，體內(nèi)降解動(dòng)物試驗(yàn)研究可與常規(guī)動(dòng)物試驗(yàn)研究合并開展。I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品的動(dòng)物試驗(yàn)可以使用兔、犬、豬、羊等不同種屬的動(dòng)物模型，采用形態(tài)學(xué)、組織生物化學(xué)、生物力學(xué)分析等進(jìn)行評(píng)價(jià)。動(dòng)物試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)宜明確的關(guān)鍵內(nèi)容見本指導(dǎo)原則附錄。

4.5.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的選擇

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型應(yīng)符合動(dòng)物試驗(yàn)?zāi)康?，建立合適的動(dòng)物疾病模型用于研究，并詳細(xì)說明選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的依據(jù)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量應(yīng)保證結(jié)果具有可靠性，并結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)考慮。如選擇的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型對于產(chǎn)品應(yīng)用于人體的安全性分析具有局限性，需對研究結(jié)果的影響進(jìn)行詳細(xì)說明。

研發(fā)產(chǎn)品的生物學(xué)效應(yīng)、機(jī)械性能、降解周期、降解產(chǎn)物同組織的相容性及組織反應(yīng)研究中，宜盡量選用符合相關(guān)國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如兔、豬、犬、羊等。需要考慮I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品的固定方式以及材料脫落風(fēng)險(xiǎn)。

4.5.3受試器械和對照品

注冊申請人應(yīng)對使用的受試器械和對照品進(jìn)行詳細(xì)的描述，包括產(chǎn)品名稱、結(jié)構(gòu)及組成（含配合使用的附件）、型號(hào)規(guī)格、使用數(shù)量、是否重復(fù)使用等信息。受試器械應(yīng)為典型性產(chǎn)品，對照品宜優(yōu)先選擇已上市的同類器械作為對照品。適當(dāng)時(shí)，動(dòng)物試驗(yàn)中可設(shè)立陰性對照組和（或）空白對照組。

4.5.4動(dòng)物試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量可結(jié)合研究目的、研究假設(shè)（如適用）、文獻(xiàn)信息、同類產(chǎn)品經(jīng)驗(yàn)等方面估計(jì)動(dòng)物試驗(yàn)數(shù)量。受試器械組關(guān)鍵觀察點(diǎn)通常包括至少6只可評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。另一方面，建議預(yù)估動(dòng)物試驗(yàn)數(shù)量時(shí)，考慮因各種原因?qū)е聦?shí)驗(yàn)動(dòng)物過早死亡的情況。

動(dòng)物試驗(yàn)的觀察時(shí)間宜根據(jù)產(chǎn)品的預(yù)期用途，評(píng)價(jià)指標(biāo)及降解周期選擇研究持續(xù)時(shí)間，同時(shí)宜參考同類產(chǎn)品的研究情況。建議觀察時(shí)間點(diǎn)為1m、3m、6m、12m或以上。動(dòng)物試驗(yàn)應(yīng)能觀察到產(chǎn)品降解特征且應(yīng)觀察到產(chǎn)品完全降解、吸收，并且產(chǎn)品對靶組織及其他組織（如適用）的影響達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。在研究中應(yīng)選擇多個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)，其設(shè)定應(yīng)有合理依據(jù)。

4.5.5評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

按照臨床標(biāo)準(zhǔn)推薦的療效指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)，并表征產(chǎn)品的降解特征。

在動(dòng)物試驗(yàn)中，應(yīng)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行完整的尸檢，包括大體和詳細(xì)的組織病理學(xué)檢查，評(píng)估指標(biāo)至少包括產(chǎn)品降解、組織再生等情況。建議評(píng)價(jià)指標(biāo)詳見本指導(dǎo)原則附錄。

4.5.6動(dòng)物試驗(yàn)方案和報(bào)告要求

動(dòng)物試驗(yàn)研究方案和研究報(bào)告應(yīng)至少包括但不局限于以下內(nèi)容：

 試驗(yàn)?zāi)康?/p>

 試驗(yàn)器材或試劑

 動(dòng)物的種類、數(shù)量及該種類作為受試動(dòng)物的合理性解釋及

選擇依據(jù)

 試驗(yàn)方法（樣品準(zhǔn)備、動(dòng)物準(zhǔn)備、手術(shù)方法）、術(shù)前準(zhǔn)備、

目標(biāo)器官/組織、手術(shù)切口控制等

 對照組類型和/或?qū)φ债a(chǎn)品的類型和選取依據(jù)

  動(dòng)物模型的種類及建立方法

  產(chǎn)品的使用步驟及時(shí)間

  觀察方法、觀察指標(biāo)與觀察周期

  數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析過程

 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)與試驗(yàn)結(jié)論

 有效性標(biāo)準(zhǔn)

 安全性指標(biāo)

 試驗(yàn)研究的結(jié)論

4.6滅菌工藝研究

描述用于保證產(chǎn)品無菌的質(zhì)量保證體系，明確滅菌工藝（方法和參數(shù)）和無菌保證水平（SAL）。I型膠原軟骨修復(fù)產(chǎn)品的無菌保證水平（SAL）需達(dá)到10-6。

該類產(chǎn)品一般為滅菌包裝交付，需提供滅菌工藝驗(yàn)證報(bào)告。對于經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌的產(chǎn)品，需提供滅菌結(jié)果確認(rèn)和過程控制報(bào)告，具體可參照GB 18279系列標(biāo)準(zhǔn)。

對于經(jīng)輻照滅菌的產(chǎn)品，需明確射線種類、輻照劑量及相關(guān)的驗(yàn)證報(bào)告。需評(píng)價(jià)滅菌方法（包括不同輻照源）對于產(chǎn)品性能的影響，并提供驗(yàn)證性能的確定依據(jù)、驗(yàn)證方案及報(bào)告以及接受指標(biāo)的確定依據(jù)，具體可參照GB 18280系列標(biāo)準(zhǔn)。

滅菌過程可對水凝膠或其他添加物質(zhì)(例如賦形劑等)的性質(zhì)產(chǎn)生影響。這些都宜在分析表征數(shù)據(jù)時(shí)加以考慮。在某種類別的水凝膠不適用常規(guī)滅菌方法時(shí)，宜在無菌條件下生產(chǎn)水凝膠,并考慮增加控制措施，例如參考藥品《除菌過濾技術(shù)及應(yīng)用指南》進(jìn)行除菌過濾，提供相應(yīng)的驗(yàn)證資料。需注意，經(jīng)過濾的膠原溶液的黏度可能改變分子量，宜在除菌過濾驗(yàn)證資料中加以評(píng)估。

4.7穩(wěn)定性研究

申報(bào)產(chǎn)品需參照《無源植入性醫(yī)療器械穩(wěn)定性研究指導(dǎo)原則》提供產(chǎn)品穩(wěn)定性研究資料。在此基礎(chǔ)上，宜將水凝膠產(chǎn)品儲(chǔ)存在溫度和pH值可調(diào)控的環(huán)境中。

貨架有效期驗(yàn)證資料中需要明確滅菌產(chǎn)品的包裝材料、包裝工藝及方法、加速老化試驗(yàn)或/和實(shí)時(shí)老化試驗(yàn)報(bào)告。加速老化試驗(yàn)中需明確試驗(yàn)溫度、濕度、加速老化時(shí)間的確定依據(jù)，論證阿列紐斯方程中各項(xiàng)參數(shù)對凝膠組分的適用性，否則宜提供產(chǎn)品實(shí)時(shí)老化試驗(yàn)報(bào)告。若申請人提供其他醫(yī)療器械產(chǎn)品的貨架有效期驗(yàn)證資料，則需提供其與本次申報(bào)產(chǎn)品在原材料、滅菌方法、滅菌劑量、包裝材料、包裝工藝、包裝方式及其它影響阻菌性能的因素方面具有等同性的證明資料。不同包裝、不同滅菌方式的產(chǎn)品需分別提供驗(yàn)證資料。

貨架有效期的確定需建立在科學(xué)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，如穩(wěn)定性試驗(yàn)，其目的是考察產(chǎn)品在溫度、濕度、光線、重力的影響下隨時(shí)間變化的規(guī)律，為產(chǎn)品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運(yùn)輸條件提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)通過試驗(yàn)建立產(chǎn)品的有效期。因此，申請人在申報(bào)產(chǎn)品注冊時(shí)，需對包裝完整性和包裝強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)價(jià)試驗(yàn)，如染色液穿透試驗(yàn)、氣泡試驗(yàn)、材料密封強(qiáng)度試驗(yàn)、模擬運(yùn)輸?shù)?，同時(shí)需結(jié)合產(chǎn)品性能指標(biāo)要求，提供產(chǎn)品有效期的驗(yàn)證報(bào)告及內(nèi)包裝材料信息。

申請人需提交運(yùn)輸穩(wěn)定性驗(yàn)證資料，可依據(jù)有關(guān)適用的國內(nèi)、國際標(biāo)準(zhǔn)和驗(yàn)證方案進(jìn)行，如：產(chǎn)品包裝的跌落試驗(yàn)、振蕩試驗(yàn)等，提交運(yùn)輸穩(wěn)定性驗(yàn)證資料，證明在規(guī)定的運(yùn)輸條件下，運(yùn)輸過程中環(huán)境條件不會(huì)對產(chǎn)品的特性和性能造成不利影響。

（四）臨床評(píng)價(jià)資料

注冊申請人需在滿足注冊法規(guī)要求的前提下，按照《醫(yī)療器械臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求選擇合適的臨床評(píng)價(jià)路徑提交臨床評(píng)價(jià)資料。

本指導(dǎo)原則涉及的I型膠原軟骨修復(fù)凝膠類產(chǎn)品為高風(fēng)險(xiǎn)器械，基于目前的審評(píng)經(jīng)驗(yàn)，除《決策是否開展醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》第三部分第（一）款中可考慮免于開展臨床試驗(yàn)的情形，原則上此類產(chǎn)品需要開展臨床試驗(yàn)。臨床試驗(yàn)需按照《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》開展，并提交完整的臨床試驗(yàn)資料。臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)可參考《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)指導(dǎo)原則》。

申請人如有境外臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)，可參照《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求提交相關(guān)資料。

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

1.產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽需符合《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》和YY/T 0466.1《醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號(hào)第1部分：通用要求》中的相關(guān)要求。

2.說明書需告知使用者所有使用過程中相關(guān)的剩余風(fēng)險(xiǎn)。對產(chǎn)品預(yù)期使用者的技術(shù)知識(shí)、經(jīng)驗(yàn)、教育背景、培訓(xùn)、身體狀況以及產(chǎn)品使用環(huán)境（含工作條件）有要求的，在說明書中需予以明確。

3.當(dāng)產(chǎn)品在臨床使用時(shí)需與其他產(chǎn)品配合，應(yīng)在說明書予以明確，研究資料中需有可配合使用的支持性資料。說明書中需提示，不應(yīng)過度注射或植入材料，以避免在損傷部位產(chǎn)生張力。對于固定形狀材料，說明書中需說明手術(shù)時(shí)是否可以進(jìn)行切割修整。

（六）質(zhì)量管理體系文件

按照《關(guān)于公布醫(yī)療器械注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》提交相關(guān)文件。

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